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主營產(chǎn)品:分光光度計,紫外可見分光光度計
分光光度法中檢出限的測定
點擊次數(shù):225  更新時間:2025-10-10

 做實驗的小伙伴,是不是經(jīng)常被“檢出限"、“定量限"這些概念搞得頭暈眼花?一份數(shù)據(jù)可不可靠,方法的靈敏度是關(guān)鍵。這篇文章,上海析譜儀器有限公司專業(yè)工程師帶來干貨滿滿的實操指南;幫你搞定分光光度法中檢出限的測定。

                     TU-1810紫外可見分光光度計

分光光度法中檢出限的測定

 1.什么是檢出限

 簡單來說,檢出限就是你的儀器和方法能夠“有把握地"檢測出待測物質(zhì)的濃度。

請注意關(guān)鍵詞:“有把握地"——它不是說儀器指針動了一下就算檢出,而是指測出的信號能明確地區(qū)分于空白溶液的背景噪音,并且有足夠的置信度(通常是99%的置信水平)。

 為什么它重要?價方法性能檢出限是衡量分析方法靈敏度的核心指標之一。數(shù)值越低,方法越靈敏。判斷數(shù)據(jù)可靠性:當樣品濃度低于檢出范圍,你的檢測結(jié)果應(yīng)報告為“未檢出"(ND),而不是一個具體的數(shù)值,否則會誤導(dǎo)他人。滿足標準要求:很多行業(yè)標準和論文投稿都要求提供方法的檢出限。

 2.三步算出檢出限


分光光度法中檢出限的測定

 國際上zui常用、也最規(guī)范的方法是 “空白標準偏差法"。別怕,公式很簡單,我們一步步來。

 第1步:準備空白溶液

 這里的“空白"指的是不含待測物質(zhì),但經(jīng)歷了全部實驗流程的溶液。比如,你用某種試劑處理樣品,那么空白溶液就應(yīng)該加入等量的試劑,并經(jīng)過同樣的加熱、定容等步驟。關(guān)鍵:空白必須真實反映整個分析過程帶來的背景干擾。

 第2步:連續(xù)測定空白信號

 用上海析譜制造的紫外可見分光光度計TU1810,連續(xù)測定空白溶液的吸光度(OD值或吸光度A)至少10次(建議11-20次,次數(shù)越多統(tǒng)計結(jié)果越可靠)。記錄下每一次的測量值。

操作提示:

※ 保持儀器穩(wěn)定。

※ 每次測量前,都用同一個空白溶液沖洗比色皿。

※ 記錄數(shù)據(jù)要準確。

 第3步:計算與結(jié)果

 現(xiàn)在輪到數(shù)學(xué)時間了,只需兩個公式:

 1、計算空白信號的標準偏差(SD)

 把你測到的所有空白信號值(比如11個吸光度值)輸入計算器或Excel,直接使用 STDEV.S 函數(shù)計算標準偏差。我們記這個結(jié)果為SD?(空白標準偏差)。

 2、套用公式,計算檢出限(LOD)

 公式:LOD = 3 × SD? / b

 這個“3"就是統(tǒng)計學(xué)上99%置信度的系數(shù),意味著信號強度是空白波動范圍的3倍時,我們才敢說“真的測到了"。

注意:上面的LOD是以吸光度(A)為單位的,我們最終需要的是濃度!

 3、將檢出限轉(zhuǎn)換為濃度單位

 你需要知道方法的靈敏度,也就是標準曲線的斜率(b)。假設(shè)你的標準曲線回歸方程是

 A =a + b×C(C是濃度),那么斜率就是b。

 最終濃度檢出限(LOD?c?) = 3×SD? / b




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